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糖發(fā)酵試驗(yàn)是zui常用的生化反應(yīng),在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們?cè)诜纸馓堑哪芰ι嫌泻艽蟮牟町?,有些?xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分解乳糖。
酸的產(chǎn)生可利用指示劑來(lái)斷定。在配制培養(yǎng)基時(shí)預(yù)先加入溴甲酚紫[pH5.2(黃色)-6.8(紫色)],當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無(wú)氣泡來(lái)證明.
盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各3支(內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管)
試管架,接種環(huán)
大腸桿菌,普通變形桿菌( Proteus vulgaris)斜面各1支
1、編號(hào)
用記號(hào)筆在各試管上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。
2、接種
取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支,按編號(hào)1支接種大腸桿菌,另1支接種普通變形桿菌,第3支不接種,作為對(duì)照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支,同樣1支接種大腸桿菌,1支接種普通變形桿菌,第3支不接種,作為對(duì)照。
3.將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對(duì)照管置37℃溫室中培養(yǎng)24小時(shí)。
4.觀察結(jié)果。
結(jié)果
將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入下表。“”表示產(chǎn)酸產(chǎn)氣;“ ”表示產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;“-”表示不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。