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ELISA試劑盒牢靠的試驗(yàn)成果
1.ELISA試劑盒之操作技能的影響
① 應(yīng)確保清潔,整個操作過程中確保酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的辦法可以使“花板"降至zui低限度。然后進(jìn)步檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確。
② 合理安排檢丈量,ELISA試劑盒避免反響板過多構(gòu)成洗板等候時刻長。
③ 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。
④ 用洗板機(jī)洗板時,確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干:還要避免針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易發(fā)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的呈現(xiàn)。
① ELISA試劑盒嚴(yán)峻溶血:以HRP為符號的ELISA試劑盒測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽性;
② 混有紅細(xì)胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈
③ 如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反響;
④ 標(biāo)本凝結(jié)不全,有時為了爭取時刻快速檢測,常在血液還未開端凝結(jié)時即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA試劑盒測定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽性成果;
⑤ 采血試管洗刷不*、重復(fù)運(yùn)用易交叉污染
⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。
血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時刻過長導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。ELISA試劑盒超越一周測定的需-20℃保存。