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PCR試劑盒

PCR試劑盒

簡要描述:PCR試劑盒用于常規(guī)PCR,高保真PCR,熱啟動(dòng)PCR,多重PCR等實(shí)驗(yàn)應(yīng)用.高性能的pcr試劑盒 助您快速獲得高質(zhì)量PCR擴(kuò)增結(jié)果.

產(chǎn)品型號(hào):

所屬分類:PCR試劑盒

更新時(shí)間:2024-01-26

詳細(xì)說明:

PCR試劑盒

它具有下列特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增巴斯德氏桿菌屬,與其他微生物沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

規(guī)格及成分

成分

編號(hào)

十孔盒包裝

PCR MagicMix 3.0

試劑一

1 mL(紅蓋)

超純水

試劑二

1 mL(亮黃色)

巴斯德氏桿菌屬PCR引物混合液

試劑三

100 μL(白蓋)

巴斯德氏桿菌屬PCR 陽性對(duì)照

(1×10E8 拷貝/μL)

試劑四

50 μL(黃蓋)

核酸釋放劑(試用裝)

試劑五

20 次(1 mL,綠蓋)

使用手冊

試劑六

1 份

運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

PCR試劑盒使用方法:

 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網(wǎng)站訂購核酸釋放劑

2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 補(bǔ)骨脂 PCR 陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)

3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。在 N+4 個(gè) PCR 管中分別加入下列成分:

成分

N+2 個(gè)樣品管

PCR 陰性對(duì)照

PCR 陽性對(duì)照

PCR MagicMix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

巴斯德氏桿菌屬PCR引物混合液

各 2 μL

2 μL

2 μL

N+2 個(gè)樣品 DNA 模板

各 18 μL

--

--

PCR 陰性對(duì)照(水)

--

18 μL

--

PCR 陽性對(duì)照(巴斯德氏桿菌屬PCR陽性對(duì)照的 1000

倍稀釋液)

--

--

18 μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):

過程

溫度

時(shí)間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)(35 個(gè)循環(huán))

95℃

15 sec

57℃

15 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix在擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產(chǎn)物陽性對(duì)照必須有預(yù)期條帶出現(xiàn),陰性對(duì)照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí)驗(yàn)無效。對(duì)沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。

 

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